肿瘤抑制基因LPP2抗体的制备步骤

　　肿瘤抑制基因LPP2抗体制备步骤：
1、制备抗原。
2、选择实验动物。
3、动物免疫。
4、试取血进行测试，看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫，杀死实验动物，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
一）抗原制备
Ig是免疫球蛋白，对异种动物而言，是良好的抗原物质。可以刺激异种动物产生抗Ig血清，
经适当提取后，产生抗Ig抗体，又叫第二抗体或抗抗体。在多数的间接标记反应中，均需制备
抗Ig抗体。
（二）材料与试剂
1．提取的动物Ig
2．弗氏佐剂和弗氏不佐剂
3．实验动物兔
4．其它材料及试剂
1.特异性——免疫原
用于产生抗体的免疫原类型显着影响抗体对靶蛋白的特异性。选择针对不合适或质量差的免疫原产生的抗体将导致不可靠且可能无法重现的结果。应注意选择针对已充分表征的免疫原产生的抗体。
2.肽
合成肽免疫原很少折叠成天然蛋白质的类似三级结构。此外，除非在合成过程中添加到肽中，否则它们不会表现出任何翻译后修饰。因此，使用肽产生的抗体可用作蛋白质印迹的有用试剂，因为由于样品处理过程中的变性和还原，靶蛋白具有线性化的表位。当抗体需要区分具有高度保守氨基酸序列的两种蛋白质时，肽也可用作免疫原。在这些情况下，产生到差异区域的肽增加了制造差异抗体的可能性。
3.天然蛋白质
如果将纯化的蛋白质用作免疫原，则针对它们产生的抗体可能无法识别蛋白质印迹中变性蛋白质的线性表位。一些使用天然蛋白质产生的抗体只能识别蛋白质表面的天然氧化构象表位。对于单克隆抗体尤其如此。
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